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产品简介
本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应。它采用M-MLV进行反转录反应，能够获得较长的反转录产物用于后续的PCR扩增和分子克隆实验。
本试剂盒中配置的酶为进口的酶。RT酶采用进口的M-MLV，所以cDNA更长，基因的信息保留得更完整！反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷，可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意事项：
1、 用于cDNA合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC进行处理，并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时，首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后，再将溶液进行过滤除菌处理。
2、 试剂盒的各组分应在-20℃保存，避免反复冻融，有效期12个月。
3、 RNA样品要避免反复多次冻融，应使RNA在冰浴中处于融化状态。
操作步骤
一、反转录反应
1、在冰浴的无 RNase 的离心管中加入如下反应成分：
1-5μg 总 RNA 或 50-500ng mRNA
2μL Oligo(dT)16或 2 pmole 基因特异性引物
补 RNase-free ddH2O 至 14.5μL
2、70℃保温 5min 后迅速在冰上冷却 2min，简短离心收集反应液后加入以下各组分：
4μL 5×M-MLV Buffer
1μL dNTPs
0.5μL RNasin
1μL M-MLV
3、42℃温浴 60min，如果是用随机引物，请先将离心管置 25℃温浴 10min，再 42℃温浴 60min。
4、95℃加热 5min 终止反应，置冰上进行后续实验或-20℃保存。
5、若用于后续 PCR 扩增,用 RNase-free ddH2O 将反应体系稀释到 50μL，取 2-5μL 作为 PCR 反应模板。
注意事项：
1、用于 cDNA 合成反应的相关试剂和耗材尽可能用 DEPC 进行处理，并在高压灭菌后使用。有些
试剂不能高压灭菌时，首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后，再将溶液进行过滤除菌处理。
2、试剂盒的各组分应在-20℃保存，避免反复冻融，有效期 12 个月。
3、RNA 样品要避免反复多次冻融，应使 RNA 在冰浴中处于融化状态。
