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产品信息
| 适用范围 | 试剂 |
|---|---|
| 使用方法 | 一、细胞准备（以 24 孔板为例） 贴壁细胞：转染前一天，胰酶消化细胞并计数，按照每孔 2-8×105个细胞的量进行铺板，使 其在转染时密度为 80-100%。 悬浮细胞：转染当天，配制 DNA 复合物之前，24 孔板中细胞铺板，每 500µL 生长培养基中 加入 4-10×105 细胞。 * 铺板时可使用抗生素，但转染时候切记移除抗生素。 * 高细胞密度仍具高转染效率，建议细胞密度大于 90%。 二、转染复合物的配置： 1. 使用 50μL 无血清培养基（如 DMEM 或 Opti-MEM 培养基）稀释 0.5μg DNA，涡旋混 匀。 2. 使用 50μL 无血清培养基（如 DMEM 或 Opti-MEM 培养基）稀释 0.6-2.5μL 转染试剂。 转染试剂稀释后室温孵育 2-5 min（在 30 min 内同稀释的 DNA 混合，保温时间过长会 降低活性）。 * 如果 DMEM 作为脂质体核酸转染试剂的稀释液，必须在 5 min 内同稀释的 DNA 混合。 * 转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，建议初次使用时设置梯度优化最佳使用 量。 三、细胞转染： 1. 混合稀释的 DNA 和稀释的转染试剂（总体积 100µL），轻轻混匀，并在室温孵育 20min。此时溶液可能会混浊，但不会影响转染。DNA-转染试剂复合物室温至少稳定保 存 5h。 2. 将 100µL DNA-转染试剂复合物滴加到 24 孔细胞板中（细胞板中培养基为 400µL），轻 轻晃动细胞板混匀。 * 如需无血清条件转染，加入复合物前将含血清培养基替换为无血清培养基即可。 3. 37℃，5% CO2 培养箱培养 18-48 h，直至进行转基因表达分析，无需去掉复合物或更换 培养基。如需要，可在转染后 4-6 h 后更换生长培养基，不会降低转染效率。 |
| 注意事项 | 1. 本产品可用于有血清培养基的转染，并且转染前后不需要换培养基。但是，制备转染复合 物时要求用无血清培养基稀释 DNA 和转染试剂，因为血清会影响复合物的形成。 2. 高细胞密度仍具高转染效率，建议细胞密度大于 90%，有利获得更高的蛋白表达。 3. 铺板时可使用抗生素，但转染时应换液将抗生素移除。 4. 使用高纯度的 DNA 或 RNA 有助于获得较高的转染效率，并去除内毒素。 5. 本产品置于 4 度保存，不可冷冻。避免反复或长时间开盖，避免脂质体氧化而影响转染效 率。 6. 初次使用建议优化 DNA 和转染试剂用量以获得最佳转染效率。DNA 和转染试剂的比例， 通常推荐是 1:2-1:3，例如使用 0.5 µg DNA 和 1-1.5 µL 转染试剂。可根据试剂情况进行 优化调整。 |
| 声明 | 仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。 |
| 保存条件 | 2-8℃保存，有效期 24 个月。 |
产品详情
BDBIO 超级转染试剂（替代 Lipo6666）是一种新型高效的阳离子聚合物。它可以与核酸 （包括质粒、siRNA、寡聚核苷酸）相互作用形成一种复合物将核酸转运到真核细胞内，适 用于大部分真核细胞的细胞转染，对难转染细胞表现出更大优势。本产品细胞毒性低，转染 后可不换液，也可在 4-6 小时后更换新鲜培养基。对高密度细胞保持高转染效率，在细胞密 度 90%以上仍具有很高的转染效率。血清不影响转染效率，可将转染复合物直接加入完全培 养基中，可减少去除血清对细胞的损伤。用量少，通常情况下对于 24 孔板转染，每次用 1- 2μL，1mL 可做 500-1000 次转染；对于 6 孔板，每次用 4-8μL，1mL 约可做 125-250 次 转染。
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