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产品信息

适用范围试剂
使用方法细胞传代:
悬浮细胞传代
1. 预热昆虫无血清培养基,100×g离心5min收集细胞,重悬后计数。
2. 以3-5 x 105个活细胞/ml的密度接种于新的培养基。昆虫细胞对机械剪切很敏感,操作 时动作需要轻柔。
3. 在27°C~28°C的无湿度、空气调节、无二氧化碳的环境中,置于摇床上以120-140rpm 的转速培养细胞。
4. 当活细胞密度达到>2×106个活细胞/mL时,进行传代。
单层细胞传代
1. 当细胞密度达到 80~90 %时,可以进行传代。
2. 传代时不需要使用胰酶消化,弃去培养瓶内旧的培养基和游离的细胞。加入新鲜预热的 昆虫无血清培养基,反复吹打5-10次,待细胞不贴壁时即可传代。吹打时动作要轻柔。
3. 观察细胞脱落情况,如果有需要,可以用手轻轻拍打瓶壁,帮助细胞解离。
培养基适应:
直接适应:
当细胞存活率≥90%,生长速率处于中对数阶段时,可以使用直接适应。单层细胞的直接使 用只需要用新鲜预热过的昆虫无血清培养基交换培养基即可。悬浮细胞的直接适应步骤如下:
1. 将细胞悬液以100 x g离心5min,弃上清。
2. 将细胞重悬于新鲜预热的昆虫无血清培养基中,细胞以>5×105个细胞/mL的密度接种于 新的培养容器中。
3. 放回培养箱,监测细胞生长情况。如果直接自适应性能不理想,请使用顺序自适应。
顺序适应
1. 在适应过程中,细胞密度>5×105个活细胞/mL。
2. 将细胞传代到逐渐增加的昆虫无血清培养基与原始培养基的比例中(1:3,1:1,3:1, 9:1,然 后是100% 昆虫细胞无血清培养基。)。在100% 昆虫细胞无血清培养基中传代几次后, 存活细胞数应超过2-4 × 106个细胞/mL,培养4-6天存活率超过85%。
注意事项1. 本产品使用过程中应注意无菌操作,避免污染。
2. 试剂包装如有破损或滴漏,严禁使用。
3. 为保持本产品的最佳使用效果,请勿进行冻融处理;
4. 禁止使用超出规定有效期的产品。
声明仅用于科研使用,不能用于临床诊断和治疗。
保存条件2℃-8°C避光保存,有效期12个月。

产品详情

BDBIO 昆虫无血清培养基是一种无动物源的,化学成分限定的即用型昆虫细胞培养基,用 于高细胞密度生长和高水平重组蛋白表达,使用杆状病毒表达载体系统。适应于昆虫细胞的 悬浮驯化及规模化无血清悬浮培养,支持昆虫细胞快速高密度扩增及高效表达蛋白。


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