产品信息
适用范围 | 试剂 |
---|---|
使用方法 | 1. 37℃水浴预热 CHO 无血清完全培养基; 2. 从培养箱中取出摇瓶,取少量细胞悬液进行细胞密度及活力检测; 3. 按照密度为3-5×105/ml个细胞接种至新的摇瓶中,置于37℃、CO2含量为5%-8%的培养 箱中,摇床( 振幅50mm,转速110-120rpm)上培养。 4. 当活细胞密度≥4×106时进行传代,使用新鲜CHO无血清培养基按3-5×105/ml重悬细胞, 并将细胞接种至新摇瓶。 瞬时转染: 1. 在瞬转开始之前,细胞应完全适应CHO无血清培养基,CHO细胞生长状态正常,传代倍 增时间稳定(一般18-24h),细胞活率维持95%以上,方可进行瞬转测试。 2. 转染时调整活细胞密度为5 x106 cells/ml(离心去掉旧培养液,改用新培养基最佳),边 摇边加入3μg/mL质粒(摇匀很重要)。 3. 边摇边加入7μg/mL转染试剂(摇匀很重要)。 补料表达: 1. 转染后12-24h 加入0.5%的表达增强剂,并降温至32℃培养。并在转染后 Day1-3-5-7- 9-11添加5%补料进行高密度高产量表达,葡萄糖按需添加。 2. 当细胞活率低于80%,培养结束,收取上清液,纯化目标产物。 3.(培养过程中参数建议如下:初始培养温度36.5℃,Day1温度降低至32℃,pH:7.1±0.2, DO:40%。摇床转速120rpm,振幅50mm, 5-8%CO2 )。 |
注意事项 | 1. 液体细胞培养基应置于2~8℃避光保存。 2. 针对不同的细胞株,由于代谢或对营养物质的需求不同,需要针对性的优化补料量,以更好的提高表达量。 |
声明 | 仅用于科研使用,不能用于临床诊断和治疗。 |
保存条件 | CHO无血清培养基:2-8℃,避光储存,有效期12个月; CHO添加物:-20℃储存,有效期12个月。 |
产品详情
中国仓鼠卵巢细胞(CHO)是目前生物工程上广泛使用的细胞,是表达复杂生物大分子的理想宿主,在医药研发治疗性蛋白生产中发挥着非常重要的作用。BDBIO CHO 无血清培养基是一款无血清、无动物源成分的培养基,包括各种高性能、现成的 CHO 细胞系培养基和添加物,是应用 CHO-DG44、CHO-K1、CHO-S 和 CHO-GS 等细胞系进行蛋白质生产的理想材料。