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产品信息
| 适用范围 | 试剂 |
|---|---|
| 使用方法 | 【适用仪器】 显微镜、二氧化碳细胞培养箱、离心机。 【样本要求】 新鲜骨髓穿刺液效果最佳，若样本无法立即接种，将样本放于2℃-8℃保存，并于3天内接种， 超过3天将影响培养效果。 【检验方法】 1. 接种：每5ml或10ml培养基中加入0.2-0.8ml的骨髓穿刺液样本，轻轻摇晃培养瓶使样本 与培养基充分混合。 2. 培养：置于37℃，5%CO2培养箱中培养24-48小时。 3. 终止培养：向每个培养瓶中加入秋水仙素溶液，始终浓度为0.05-0.1μg/ml，轻轻摇匀后， 放入培养中静置1-2小时。 4. 收获细胞：将培养液转移至离心管中，1500rpm离心10分钟。 5. 低渗：弃去上清液，加入37℃预温的0.075 mol/L的KCl低渗液8-10ml，混匀使细胞重 新悬浮，37℃孵化25-35分钟。 6. 预固定：以冰醋酸：甲醇=1：3的比例配置固定液。每个离心管中加入1-2ml的固定液， 充分混匀后1500rpm离心10分钟。 7. 固定：弃去上清，每个离心管中加入8ml的固定液，充分混匀后静置20-30分钟，随后 1500rpm离心10分钟。 8. 再次固定：弃去上清，每个离心管中加入8ml的固定液，充分混匀后静置10分钟，随后 1500rpm离心10分钟。并重复该步骤一次。 9. 制片：将固定后的细胞悬液调至合适的浓度滴于用冰水预冷的载玻片上，每张载玻片上 滴2-3滴，可通过酒精灯外延5-6秒或者用口轻轻吹散。放入80℃烤箱中烤片2~3小时， 或50℃过夜烤片。 10. 染色体分带：玻片从烤箱中取出，室温冷却后可进行G显带和R显带分型，吉姆萨染液染 色后显微镜下观察进行染色体核型分析。 【阳性判断值或者参考区间】 细胞倍增指数大于2 【检验结果的解释】 1. 固定液每次使用必须新鲜配制，否则将会形成酯类，形成背景较为明显，从而影响制片 效果； 2. 当遇到经过多次放疗、化疗和药物治疗的病人，重复两次标本都缺乏有丝分裂相，可能 是病人本身原因造成的。 3. 细胞培养时间、加入秋水仙酰胺的量以及低渗操作时间会影响样品制备效果，需要根据 实际样本及实验条件进行适当调整。 【检验方法的局限性】 仅用于培养骨髓细胞。 |
| 注意事项 | 1. 细胞密度以2×106/ml左右为宜。 2. 短期内可放4-8℃保存，若长期储存，应放-10℃至-20℃保存，不可反复冻融。 3. 本产品只用于体外诊断，操作过程应避免污染；操作人员在检验时应做好防护，预防疾 病传播。 4. 试剂包装如有破损或滴漏，严禁使用。 5. 溶液应为澄清，如有沉淀物，严禁使用。 6. 禁止使用超出规定有效期的产品。 |
| 声明 | 仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。 |
| 保存条件 | 培养基应在-20℃避光储存，有效期为24个月。 |
产品详情
主要组成成分:RPMI-1640培养基、胎牛血清、抗生素、肝素钠、碳酸氢钠、纯化水。
新鲜骨髓样本在骨髓细胞培养基中短暂培养后，加入有丝分裂抑制剂，使细胞有丝分裂停留 在中期，通过染色体显带技术对染色体进行分析、比较、排序和编号，判定是否存在染色体 数目或形态结构异常，从而在一定程度上诊断染色体疾病。
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