来源 | 骨 |
---|---|
形态 | 贴壁、上皮样 |
培养 | McCoy's 5a培养基+15%FBS 37℃ 5%CO2 |
传代 | 0.25%胰蛋白酶消化3-4min,比例1:2-1:3 |
产品简介 | 人骨肉瘤细胞( The human osteosarcoma cell line) SAOS-2来自11岁白人女性的骨肉瘤组织。细胞贴壁生长、呈现上皮样,该细胞是合适的转染宿主,该细胞是评估骨移植替代材料的首选细胞,常被用于骨变性,肿瘤等疾病的研究。 |
收货指南 | 1. T25细胞瓶到货后处理方案: (1) 验货:培养瓶上标签、培养瓶完好性以及瓶口是否有漏液; (2) 处置:75%酒精对培养瓶消毒后,放入37℃,5% CO2的培养箱静置培养2-4小时后,进行显微观察、拍照,作为售后维权依据; (3) 注意:贴壁细胞在运输过程中发生细胞脱落,这是正常现象,静置后可恢复贴壁。 2. 冻存管到货后处理方案: (1) 验货:包装的标签、包装内是否有干冰、冻存管完好性; (2) 处置:尽快复苏(见培养方法)或程序降温后转移至液氮中保存。 |
培养方法 | 1.培养基: 84% McCoy's 5a培养基 ;15% 胎牛血清(FBS);1%青霉素-链霉素(P/S)。 2. 复苏: (1)解冻:用镊子将冻存管浸于37 ℃水浴;反复摇晃,迅速完成解冻; (2)离心:喷洒75%酒精消毒后,在无菌环境下,打开冻存瓶,用移液器将细胞连同冻存液移至含1 mL完全培养基的10 mL离心管中,室温1200 rpm离心3-5 min,细胞沉于离心管底部; (3)培养:将上清液轻轻弃去,加2 mL完全培养基,轻柔悬起细胞,然后将所有细胞悬液移至含有3 mL完全培养基的T25培养瓶中,于37 ℃,5% CO2培养箱中培养; (4)观察:每日观察细胞生长状态(培养基颜色、细胞贴壁情况、形态与密度等)并拍照。 3. 传代: 细胞密度达80%-90%开始传代 (1)清洗:无菌下吸出培养基,用37 ℃预热的PBS清洗一次; (2)消化:加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液,转动培养瓶令其浸润所有细胞,室温(或37 ℃)消化,显微镜下观察到细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回超净台,轻敲几下培养瓶后加1 mL完全培养基终止消化; (3)离心:用移液器轻柔吹匀后然后将悬液转移至10 mL离心管中,在1200 rpm离心3-5 min; (4)培养:无菌下弃上清液,加1 mL完全培养基悬起细胞并移至T25培养瓶中;按1∶ 2-1∶ 3比例添加完全培养基,用移液器轻柔吹匀后,分装至培养瓶中,于37 ℃,5% CO2培养箱中培养。 |
生物安全等级 | 1 请在无菌环境中操作,避免污染; 为了保护细胞的稳定性,细胞传代次数不宜过多; 为了结果的可靠性,实验前请确认细胞状态良好; 严格遵守生物安全操作规程。 |
免责声明 | 本产品仅用于科研目的,不得用于临床诊断、治疗等用途。用户应遵循国家和地区的法律法规,自行承担使用本产品所产生的一切风险和责任。 请在使用前仔细阅读本说明书,并按照指导操作。如有任何疑问或需要进一步信息,请与我们联系。 |
暂无