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首页 > 通用耗材 > 细胞相关耗材 > 细胞冻存 > 细胞冻存液 > 百迪PBMC/NK专用冻存液100ml
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产品信息

适用范围试剂
使用方法(一)配制即用型冻存液
1. 取新鲜外周血(枸橼酸钠抗凝),300g,离心10min。
2. 自体血浆制备:
(1)取上半部分2/3的血浆层,放入50ml离心管中,56℃,灭活30min
(2)取出离心管,放入-20℃静置10min
(3)取出离心管,4℃,1100g,离心15min
(4)取出上面部分澄清血浆层,放入新50ml离心管中
3. 即用型冻存液配制:灭活后血浆:冻存液按照1:4比例混合,即可成即用型冻存液。(例: 800ul冻存液加200ul灭活血浆)
(二)细胞冻存及复苏
1. 人外周血单个核细胞收集 取新鲜人外周血,使用枸橼酸钠抗凝后,离体2h内做PBMC分离,参照样本密度分离液 操作规程分离获得。
2. 细胞冻存 将收集的PBMC用细胞保存液重悬,使其浓度为1*107/ml(可根据实际实验需求进行调 整)。分装至冻存管中,每管1ml,放置于程序降温盒中缓慢降温24h,然后置于液氮中 长期保存。
3. 细胞复苏
(1) 将水浴锅温度调至37℃,取出冻存管快速置于水浴锅内,晃动冻存管直至管中冻存细 胞融化;
(2) 将溶化的细胞冻存悬液转移至含有5-10倍体积完全培养基的离心管中,轻轻混匀;
(3) 室温300g离心10min;去除上清液,加入已回温的完全培养基重悬细胞,进行细胞计 数,根据计数结果,取适量的细胞悬液接种到新的培养瓶内;
(4) 将复苏好的细胞转移至37℃,5% CO2培养箱中,按常规方法培养。
注意事项1. 试剂包装如有破损或滴漏,严禁使用。
2. 请遵守严格无菌的工作规范,操作过程避免污染。
3. 使用前应详细阅读使用说明书,在有效期内使用。
4. 该冻存液为非即用型冻存液,如果配制成即用型冻存液必须冷冻保存。
声明仅用于科研使用,不能用于临床诊断和治疗。
保存条件室温至-196℃保存,有效期 12 个月;加完自体血浆后-20℃保存。

产品详情

BDBIO PBMC/NK专用冻存液是一款专门针对血液来源的PBMC及脐血干细胞冻存而设计的 非即用型冻存液,本产品无血清,无其他异源成分,使用前需添加灭活自体血浆使用,达到 高安全性。


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