产品信息
适用范围 | 试剂 |
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使用方法 | (一)配制即用型冻存液 1. 取新鲜外周血(枸橼酸钠抗凝),300g,离心10min。 2. 自体血浆制备: (1)取上半部分2/3的血浆层,放入50ml离心管中,56℃,灭活30min (2)取出离心管,放入-20℃静置10min (3)取出离心管,4℃,1100g,离心15min (4)取出上面部分澄清血浆层,放入新50ml离心管中 3. 即用型冻存液配制:灭活后血浆:冻存液按照1:4比例混合,即可成即用型冻存液。(例: 800ul冻存液加200ul灭活血浆) (二)细胞冻存及复苏 1. 人外周血单个核细胞收集 取新鲜人外周血,使用枸橼酸钠抗凝后,离体2h内做PBMC分离,参照样本密度分离液 操作规程分离获得。 2. 细胞冻存 将收集的PBMC用细胞保存液重悬,使其浓度为1*107/ml(可根据实际实验需求进行调 整)。分装至冻存管中,每管1ml,放置于程序降温盒中缓慢降温24h,然后置于液氮中 长期保存。 3. 细胞复苏 (1) 将水浴锅温度调至37℃,取出冻存管快速置于水浴锅内,晃动冻存管直至管中冻存细 胞融化; (2) 将溶化的细胞冻存悬液转移至含有5-10倍体积完全培养基的离心管中,轻轻混匀; (3) 室温300g离心10min;去除上清液,加入已回温的完全培养基重悬细胞,进行细胞计 数,根据计数结果,取适量的细胞悬液接种到新的培养瓶内; (4) 将复苏好的细胞转移至37℃,5% CO2培养箱中,按常规方法培养。 |
注意事项 | 1. 试剂包装如有破损或滴漏,严禁使用。 2. 请遵守严格无菌的工作规范,操作过程避免污染。 3. 使用前应详细阅读使用说明书,在有效期内使用。 4. 该冻存液为非即用型冻存液,如果配制成即用型冻存液必须冷冻保存。 |
声明 | 仅用于科研使用,不能用于临床诊断和治疗。 |
保存条件 | 室温至-196℃保存,有效期 12 个月;加完自体血浆后-20℃保存。 |
产品详情
BDBIO PBMC/NK专用冻存液是一款专门针对血液来源的PBMC及脐血干细胞冻存而设计的 非即用型冻存液,本产品无血清,无其他异源成分,使用前需添加灭活自体血浆使用,达到 高安全性。