M199全称Medium 199,即培养基199,是Morgan等在1950年设计的,最初用于鸡胚成纤维细胞的营养研究,现已广泛应用于各种动物细胞的培养,包括一些非哺乳类动物细胞。M199特别适用于非转化细胞的培养,也常用于病毒学、疫苗生产,以及大鼠胰腺上皮细胞和小鼠晶状体组织的培养。与其他基础培养基相比,M199含有独特的成分,包括腺嘌呤、腺苷、次黄嘌呤、胸腺嘧啶、以及其他的维生素。M199有两种平衡盐成分,Earle's盐成分常用于CO2环境,Hank's盐成分用于非CO2的环境。
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一种高级细胞培养添加剂,可直接替代细胞培养基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必需的一种营养素,但其在溶液中不稳定,会自发降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨对细胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的稳定,不会自发的降解。细胞利用其机制是:在细胞培养时,细胞会逐渐向培养液中释放一种肽酶,将L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后细胞会将这两种水解产物吸收利用。细胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的过程与流加培养策略相似,连续的将低浓度水平的L-谷氨酰胺加入到培养液中,从而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不会生成多余的氨,更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩尔的L-谷氨酰胺,适用于所有的细胞,几乎无需适应,并且可以延长细胞的培养时间,减少传代次数,即节省了时间也节约了金钱。与添加 L-谷氨酰胺的培养基中培养的细胞相比,活性降低得更慢。 延滞期略微延长的原因是肽酶的释放和二肽的消化需要一定的时间。
酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值7.2~7.4时为红色,最适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类激素(特别是雌激素)的作用,因此在用到雌激素敏感的细胞时(如乳腺组织),最好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。
本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,但不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。
形态 | 液体 |
浓度 | 1× |
规格 | 500mL |
PH | 7.2~7.4 |
平衡盐 | Earle's 盐 |
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺 | 100mg/L |
NaHCO3 | 2200mg/L |
D-葡萄糖 | 1000mg/L |
HEPES缓冲剂 | 无 |
酚红指示剂 | 无 |
储存条件 | 2℃~8℃,避光 |
运输条件 | 常温 |
有效期 | 12个月 |