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首页 > 通用耗材 > 其他耗材 > 其他耗材 > TaKaRa 人心脏cDNA文库cDNA Library,Human Heart
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□ 浓度      200 μg/ml □ 贮存溶液      Tris-HCl (pH 8.0)10 mM     EDTA1 mM

■ 制品说明
本系列制品是基于Gubler and Hoffman方法 (Gene 25:263-269、(1983)), 由各种Poly(A)+ RNA制作的质粒DNA型cDNA文库。合成cDNA片段时,使用了含有限制酶Not I位点的Oligo (dT)18 Linker Primer和BamH I (Bgl II)-Sma I 接头,通过这两个限制酶位点,使cDNA片段定向克隆到载体中。克隆前,做了短片段的分离处理,300 bp以下的片段大部分被去除掉。初级文库构建完成后,采用了固体平板培养法,仅对初级文库进行一次扩增,然后使用质粒提取试剂盒,从扩增文库的菌体中提取质粒,调整得到扩增的质粒cDNA文库。使用这种方法得到的扩增文库,尽可能保持了各种cDNA片段的克隆在初级文库中所占的比例。 ■ 保存-20℃。 ■ cDNA文库使用的载体和多克隆位点本cDNA文库制品使用的载体为pAP3neo,含有SV40启动子,可以在哺乳动物细胞中进行表达。同时,该载体含有ssDNA生成的必要f1 ori、也含有便于RNA合成的T7及T3 RNA聚合酶启动子。GenBank Accession No.AB0034681. cDNA片段克隆在pAP3neo载体的Bgl II位点和Not I位点之间。* 由于cDNA片段合成时,使用了BamH I (Bgl II)-Sma I接头,克隆后,载体的Bgl II 位点失效,不能再被Bgl II酶切开。2. Xba I 位点受dam methylase的影响。 ■ 用途对未知或已知的cDNA进行PCR筛选。


■ pAP3neo载体结构图

cDNALibrary,HumanHeart
品牌CodeNo.产品名称包装量
Takara9504cDNALibrary,HumanHeart5μg


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