如何储存和解冻胎牛血清

才不会使产品质量受损? 

● 冷冻  未拆封的胎牛血清，一般情况下应存放于-10℃至-20℃，在产品规定的效期内均可使用，若一次无法用完一瓶，建议无菌分装胎牛血清至合适大小的无菌离心管内，再放回冷冻。

● 溶解  将胎牛血清从冷冻冰箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解。完全融解后建议尽快使用，若长时间储存在2-8℃，胎牛血清中的各种（脂）蛋白（如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等）可能因凝集而形成沉淀或可见的混浊。

总而言之：胎牛血清推荐在-10至-20℃条件储存，并避免反复冻融

胎牛血清中絮状沉淀是什么

怎么处理?  

● 是什么  胎牛血清中沉淀物的出现有许多种原因，但普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的变性所造成，而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解冻后，也会存在于胎牛血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物，并不影响胎牛血清本身的质量。若欲去除这些絮状沉淀物，可以将胎牛血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞您的过滤膜。

● 怎么处理

1.将冷冻保存的胎牛血清取出后，置4℃冰箱静止过夜；
2.待胎牛血清融化后，上下颠倒轻轻混匀，继续4℃2-3小时；
3.轻轻吸取上层血清，分装，余底下50ml左右；
4.低速离心5分钟，去掉沉淀。

● 建议  解冻胎牛血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温)，若胎牛血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃)，实验显示非常容易产生沉淀物。解冻胎牛血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。请勿将胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，胎牛血清会变得混浊，同时胎牛血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响胎牛血清的质量。胎牛血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。若必须做胎牛血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。

如何避免血清中产生沉淀?

1.胎牛血清解冻时，请随时将胎牛血清摇晃均匀，使温度及成分均一；

2.胎牛血清分装冻存时，须将其规则摇晃均匀（小心勿造成气泡）；
3.切勿由-20℃直接至37℃水浴锅解冻，较大的温差，易造成蛋白质凝结而发生沉淀；
4.切勿将胎牛血清置于37℃过长时间，否则可能使之浑浊，其中一些不稳定的组分也会因此受到影响，终降低胎牛血清的品质；
5.胎牛血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤；
6.若必须做胎牛血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且保持摇晃均匀。温度过高、时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增加。

为什么要热灭活血清

是否有必要做热灭活？

● 热灭活  加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究，培养ES 细胞，昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活胎牛血清。

● 是否有必要做热灭活  实验显示，经过正确处理的热灭活胎牛血清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的胎牛血清对细胞的生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响了胎牛血清的质量，而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的胎牛血清，沉淀物的形成会显著的增多，这些沉淀物在倒置显微镜下观察，像是“小黑点”，常常会让研究者误以为是胎牛血清遭受污染，而把胎牛血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。因此我们建议您，若非必须，您可以不需要做热处理这一步。如此一来，不但节省您宝贵的时间，更确保胎牛血清的质量。

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